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      賽默飛2720PCR儀為什么3次循環才能得到目的基因?
    3. 發布日期:2022-06-15      瀏覽次數:29
      •   賽默飛2720PCR儀是一種在DNA擴增反應中,以熒光化學物質測每次聚合酶鏈式反應(PCR)循環后產物總量的方法。通過內參對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析的方法。
         
          數字PCR是近年來迅速發展起來的一種定量分析技術。該技術結果判定不依賴于擴增曲線的循環閾值(Ct),不受擴增效率的影響,具有很好的準確度和重現性,并且可以實現定量分析。數字PCR已經在核酸檢測、鑒定等研究領域顯示出巨大的技術優勢和應用前景。
         
          定量PCR是依靠標準曲線或參照基因來測定核酸量,而數字PCR則讓你能夠直接數出DNA分子的個數,是對起始樣品的定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應用領域:拷貝數變異、突變檢測、基因相對表達研究(如等位基因不平衡表達)、二代測序結果驗證、miRNA表達分析、單細胞基因表達分析等。
         
          賽默飛2720PCR儀技術中為什么3次循環才能得到目的基因?
         
          1、第1個循環擴增出來的新片段很長很長。
         
          2、第2個循環以新的長片段為模板進行,但新片段的一端是引物開頭的,所以第2個循環得到的片段就是我們需要的長度,但只是一條鏈,所以還不能分離出目的基因。
         
          3、第3個循環,當以第2個循環得到的新片段為模板時,因為這個片段的長度就是需要擴增的長度,當第三個循環完成時,這個片段是需要的長度,且是雙鏈DNA,這就得到了需要的目的基因了。
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